La citometría de flujo es una tecnología que permite evaluar diferentes características simultáneamente de una célula o partícula en suspensión, como son el tamaño y la complejidad interna, así como, algún componente celular o la función marcada con fluorescencia. Aunque la citometría de flujo es una tecnología relativamente reciente, sus características especiales como técnica de análisis celular han propiciado, en la última década, un rápido incremento en su uso, tanto en los laboratorios de investigación básica como en los laboratorios clínicos

El presente manual fue elaborado para apoyar los cursos de licenciatura y posgrado, sobre citometría de flujo, que se imparten en la División de Ciencias Biológicas y de la Salud. Tiene como objetivo introducir al alumno en el manejo del citómetro de flujo, por medio de la realización de prácticas para la evaluación de diversas características de las células por medio de esta tecnología.

Las prácticas propuestas son factibles de realizar, fueron elaboradas tomando en consideración los recursos disponibles para su desarrollo con los citómetros de flujo con los que cuenta la División de Ciencias Biológicas y de la Salud de la Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Iztapalapa.

En la primera parte del presente manual, se exponen los conceptos básicos de la citometría de flujo. A continuación se incluye un apartado en el que se presentan las medidas de seguridad esenciales para el trabajo en el laboratorio. En seguida se incluyen las prácticas.

La práctica 1 tiene como objetivo la demostración del citómetro de flujo, en ella se explican sus componentes principales y el funcionamiento general del equipo. En la práctica 2 se lleva a cabo el proceso para la calibración y optimización del equipo. En la práctica 3 se enseña el método para la separación de células por medio de citometría de flujo. En la práctica 4 se efectúa el análisis del contenido de ADN y se identifican a las células en las diferentes fases del ciclo celular. La práctica 5 tiene como objetivo determinar la viabilidad celular de una muestra biológica utilizando citometría de flujo. En La práctica 6 se determina el porcentaje de las diferentes subpoblaciones de leucocitos y linfocitos en sangre periférica de humano. Y, en la práctica 7 se desarrolla un método alternativo para cuantificar al ADN.

Por último se incluye bibliografía complementaria para que los alumnos puedan ampliar los conocimientos que les resulten más atractivos.

Por medio de la realización de estos protocolos, se demuestra que la citometría constituye un complemento valioso de las técnicas clásicas utilizadas para el estudio de la morfología, biología y bioquímica celular.